綠膿桿菌在自然界中的水、空氣和土壤中均有存在，可產(chǎn)生多種外毒素和內(nèi)毒素，常引起人皮膚化膿感染。因此，水和化妝品常需檢測銅綠假單胞菌。在《GB/T 7918.4-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 綠膿桿菌》中規(guī)定，化妝品不得檢出銅綠假單胞菌。

對銅綠假單胞菌分離選擇用培養(yǎng)基在國標(biāo)中有具體的規(guī)定。但近年來，隨著顯色培養(yǎng)基的逐步使用，顯色培養(yǎng)基的優(yōu)勢逐漸顯現(xiàn)出來。它利用細(xì)菌特異性酶與顯色底物發(fā)生反應(yīng)，直接通過菌落有暗色初步鑒別微生物，已成為一種非常實(shí)用的新型快速分離方法。

有人對傳統(tǒng)分離選擇培養(yǎng)基（如CN選擇培養(yǎng)基，十六烷*基溴化胺瓊脂，乙酰胺瓊脂，CFC瓊脂）進(jìn)行過檢測和評論1，發(fā)現(xiàn)在CN、CFC 培養(yǎng)基上，銅

綠假單胞菌呈黃綠色，惡臭假單胞菌呈黃色，兩類菌顏色相近，并不容易區(qū)分，因此會增大鑒定工作量。十六烷*基溴化銨瓊脂上，銅綠假單胞菌與惡臭假單胞菌形態(tài)顏色均相似，不適宜作為選擇性培養(yǎng)基使用。乙酰胺瓊脂、假單胞菌顯色培養(yǎng)基能明顯將銅綠假單胞與惡臭假單胞菌、熒光假單胞菌區(qū)分開，但乙酰胺瓊脂上目標(biāo)菌菌落較小，可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分離。

因而，作者認(rèn)為，十六烷*基溴化胺瓊脂培養(yǎng)基對假單胞菌屬特異性較差，CFC 瓊脂選擇性較弱，而乙酰胺瓊脂則存在目標(biāo)菌生長速度過慢，增菌時(shí)間長，缺乏時(shí)效性等問題，且 CN 選擇性培養(yǎng)基在樣品污染量大時(shí)，容易出現(xiàn)菌落成片無法計(jì)數(shù)的情況。

HiMedia公司開發(fā)的綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，系用熒光法分離銅綠假單胞菌。銅綠假單胞菌分泌幾種色素，包括綠膿素（藍(lán)綠色）、熒光素（黃綠色，發(fā)熒光）、紅膿素（棕紅色）。King等人開發(fā)了King A培養(yǎng)基，用于提高綠膿素和紅膿素的產(chǎn)出，以及King B 培養(yǎng)基用于提升熒光素的產(chǎn)出。該顯色培養(yǎng)基用植物源蛋白胨取代動物蛋白胨，并基于King 等人的配方而成（熒光混合劑除外）。培養(yǎng)基中的溴棕*銨抑制其他菌群生長。它作為季銨類化合物和陽離子表面活性劑，使銅綠假單胞菌之外的細(xì)菌菌體釋放出氮和磷。銅綠假單胞菌裂解熒光底物，使UV下發(fā)射熒光。

在該培養(yǎng)基中，銅綠假單胞菌UV下發(fā)出熒光（下圖），而嗜麥芽窄食單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌均被抑制。

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商，一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn)，具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001：2008，ISO13485：2003認(rèn)證，CE認(rèn)證和FDA注冊登記，尤其通過CE的體外診斷注冊。其產(chǎn)品行銷140多個(gè)國家。

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參考文獻(xiàn)

1. 伊鋆，何平，楊明，盧躍鵬，酈娟，江小明. 五種選擇性培養(yǎng)基檢測銅綠假單胞菌效果比較. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2017, 44(15): 2829-2835